Поиск

Полнотекстовый поиск:
Где искать:
везде
только в названии
только в тексте
Выводить:
описание
слова в тексте
только заголовок

Рекомендуем ознакомиться

'Регламент'
Нормативно-правові документи, які регламентують діяльність освітянських закладів визначили зміст, напрями і завдання реформуючих процесів, що відбува...полностью>>
'Расписание'
Открытый Чемпионат и Первенство Южного федерального округа по тхэквондо ИТФ «Кубок Черноморского Побережья» проводится 27-30 октября 2011 года по адр...полностью>>
'Публичный отчет'
ринга, а именно: социально-экономическому, водных экосистем (гидрохимический, гидробиологический, ихтиологический), фауны и животного мира, почвенных ...полностью>>
'Документ'
1. Старинная нижегородская летопись века гласит: «Сползла гора от материе степи да пошла под ту гору, над которой монастырь стоит и с лесом, и вошла в...полностью>>

Влияние биологически активных клеточных компонентов растений на структурные изменения бактериальных клеток 030025 Гистология, цитология, клеточная биология

Главная > Автореферат диссертации
Сохрани ссылку в одной из сетей:

На правах рукописи

НАЗАРОВА ГУЗЕЛЬ НАИЛЕВНА

ВЛИЯНИЕ биологически активных клеточных компонентов растений НА СТРУКТУРНЫЕ ИЗМЕНЕНИЯ БАКТЕРИАЛЬНЫХ КЛЕТОК

030025 Гистология, цитология, клеточная биология

Автореферат диссертации
на соискание ученой степени

кандидата биологических наук

Астрахань – 2009

Работа выполнена на кафедре физиологии и морфологии человека и животных Астраханского государственного университета

Научный руководитель:

кандидат биологических наук, доцент Сухенко Людмила Тимофеевна

Официальные оппоненты:

доктор биологических наук, профессор Лазько Марина Владимировна

доктор медицинских наук, профессор Наумова Любовь Ивановна

Ведущая организация: Волгоградский медицинский университет

Защита состоится «20» февраля 2009 г. в 14.00.часов
на заседании диссертационного совета ДМ 212.009.01 по защите докторской и кандидатской диссертации при Астраханском государственном университете по адресу: 414000, г. Астрахань, пл. Шаумяна, 1. ЕИ АГУ.

С диссертацией можно ознакомиться в библиотеке Астраханского государственного университета

Автореферат разослан «__»______________2009 г.

Ученый секретарь

диссертационного совета,

доктор биологических наук Ю.В. Нестеров

Общая характеристика работы

Актуальность темы

Известно, что животные и растительные организмы состоят из совокупности клеток, связанных между собой гуморальными и нервными формами регуляции и составляют тканевые или органные композиции. Однако, клетки микроорганизмов по своей структуре и функциям, являют собой полноценный одноклеточный организм, отвечающий за физиологическую регуляцию и саморепродукцию (В.Б.Сбойчаков, 2007).

Поэтому в нашей работе изучались клетки микроорганизмов как самостоятельные саморегулирующие и самовоспроизводящие структуры, а также взаимосвязи бактериальных клеток с организмом-хозяином, динамика изменений морфологии и функции микробных клеток под влиянием компонентов биологически активных веществ, выделяемых клетками ряда дикорастущих растений.

К клеткам микобактерий, вызывающим патологию в отношении человеческого организма, относятся клетки Mycobacterium leprae и Mycobacterium tuberculosis. Естественным окружением клеток микобактерий лепры в случае взаимоотношении с тканями организма – хозяина являются клетки подкожной клетчатки и лимфы большинстве случаев макрофаги. По мнению автора, в случае инфицирования Mycobacterium leprae, претерпевают изменения не только клетки хозяина, в том числе макрофагальные клетки, но и структура самой микобактерии видоизменяется в сравнении с «типичной» (P.Draper, 1986).

Механизм действия современных химиотерапевтических препаратов на микробную клетку сложен и многообразен. Он связан с их влиянием на ферментативную систему микроба, интенсивность дыхания, обмен веществ, а в результате этого на процессы размножения и жизнедеятельности бактерий. Однако те же средства оказывают влияние на состояние нервной и эндокринной систем организма-хозяина, тканевое дыхание, обмен витаминов в организме, а также на течение воспаления. Именно с общим и органотропным действием химиотерапевтических средств связаны, в частности, возникающие во время лечения аллергические и токсические проявления в виде дисфункции нервной системы, желез внутренней секреции, печени, желудочно-кишечного тракта, нарушения нормального кроветворения и т.д. (А.В.Забелин, 1882).

В связи с неблагополучной ситуацией по туберкулезу в последние годы стало увеличиваться число клеток M.tuberculosis с множественной лекарственной устойчивостью к наболее распространенным химическим антибиотикам изониазиду и рифампицину. По мнению многих ученых фтизиаторов, это вызывает интерес к изучению структуры и особенностей клеточной организации этих микобактерий, их взаимодействия с химическими препаратами в организме (О.А. Иртуганова, 2006). Известно так же, что в организме, инфицированном M.tuberculosis отмечается дефект функциональной активности моноцитов периферической крови, в частности, по показателям угнетения их поглотительной способности (В.А. Шатров с соавт., 1985).

Актуальность использования лекарственных растений неизмеримо возросла в последние десятилетия. Это связано с высокой активностью некоторых компонентов растений по отношению к клеткам-возбудителям и меньшей степенью резистентности микроорганизмов к растительным веществам (Л.Т.Сухенко с соавт., 2007).

В последнее время описаны химические структуры и биологическая активность комплекса компонентов внутриклеточного содержимого растительных организмов. Некоторые белковые соединения растений, такие как лектины, являющиеся аналогами антител животного и человека так же могут обладать иммуномодулирующими свойствами (В.М.Лахтин, 1987-1989). Изучение взаимодействия углеводных компонентов поверхностей клеточных стенок прокариот с биологически активными веществами растений, может дать информацию о лектинах, содержащихся среди них, а также обосновать применение растительных препаратов при лечении инфекционных заболеваний (А.Антонюк, 1987).

Поэтому, необходимость дальнейшего и более тщательного изучения воздействия биологически активных клеточных веществ растений на морфологические особенности бактериальных клеток, в том числе микобактерий и их структурные компоненты не вызывает сомнений.

Результаты изучения влияния на структуры клеток патогенных бактерий позволят предложить новые формы противомикробных препаратов, которые будут губительно действовать на микроорганизмы. Понимание структур микобактерий, возможно, поможет разработать такие растительные препараты, которые наилучшим образом смогут проникать внутрь бактериальных клеток и их разрушать или инактивировать.

Цель настоящего исследования:

Изучить влияние биологически активных клеточных компонентов дикорастущих лекарственных растений Астраханского региона на структурно-морфологические изменения бактериальных клеток, в том числе микобактерий.

Задачи исследования:

  1. Методами световой и электронной микроскопии изучить структурно-морфологические особенности клеток микобактерий М.tuberculosis, М.lufu и М.leprae без действия и под влиянием клеточных компонентов растений.

  2. Изучить влияние биологически активных растительных веществ на функциональную активность перитонеальных макрофагов мышей, зараженных внутрибрюшинно М.tuberculosis.

  3. Изучить миелопероксидазную способность системы фагоцитов повышать имммунопротективный эффект в присутствии биологически активных веществ.

  4. Провести сравнительное изучение морфологических особенностей клеток Staphylococcus aureus в норме и при воздействии биологически активных веществ некоторых растений Астраханской области.

  5. Изучить возможность использования биологически активных веществ экстрагируемых из клеток растений для оптимизации лечения ряда инфекционных заболеваний в эксперименте.

Научная новизна исследования:

  1. Впервые проводилось изучение структурно-морфологических особенностей бактериальных клеток (Mycobacterium tuberculosis, Mycobacterium lufu, Mycobacterium leprae и Staphylococcus aureus) в качестве под влиянием биологически активных веществ клеточных дикорастущих растений Астраханского региона.

  2. Впервые изучено влияние на морфологические особенности биологически активных веществ ряда дикорастущих растений Астраханского региона на структуру различных видов патогенных и условно-патогенных микобактерий.

  3. Обнаружены лектин – углеводные инактивирующие и разрушающие клетку микроорганизмов, взаимодействия между углеводными рецепторами Staphylococcus aureus и лектиноподобными компонентами клеток растений Астраханской области.

Практическая значимость работы:

  1. Новые теоретические и практические понятия (данные) о взаимодействии с клетками микобактерий биологически активных веществ растений, что может быть использовано в комплексной терапии микобактериозов.

  2. Некоторые результаты данной работы вошли в инновационный проект, финансируемый фондом развития малых форм предприятий в научно-технической сфере (ФРМФНП) «Старт 2007»: «Разработка новых растительных препаратов «ГЛИЦИР-ФИТ» с антибактериальным действием».

  3. В результате научных разработок предложены способы ингибирующего влияния нативных растительных веществ на клетки микобактерий, обладающие, как профилактическим, так терапевтическим действием.

  4. Получено положительное решение Федерального института промышленной собственности (ФИПС) на заявку: «Экстракт солодки голой, обладающий противотуберкулезной активностью».

Личное участие автора в получении научных результатов.

Автором лично выполнен полностью весь объем диссертационного исследования: контроль и наблюдение за ходом экспериментов, выполнение морфологических, иммунологических, микробиологических и часть цитохимических методик. Электронно-микроскопические исследования выполнены под руководством и при участии А.К. Маслова в НИИ по изучению лепры.

Положения, выносимые на защиту.

    1. Изучено изменение морфологических признаков клеток микобактерий: M.tuberculosis, M.lufu in vitro и mycobacterium leprae in vivo под влиянием биологически активных веществ экстрактов из соцветий Helichrysum arenarium L.. Achillea micrantha W., корня, стебля и листьев Glycyrrhiza glabra. Показано, что клетки микобактерий под влиянием биологически активных веществ экстрактов, подвергаются фрагментации, а основные структурные компоненты клеток (клеточная стенка, плазматическая мембрана, цитоплазма, рибосомы, включения) были разрушены.

    2. Показано, что в основе механизма действия биологически активных растительных веществ лежит повышать функциональную активность перитонеальных макрофагов и увеличивать активность фермента миелопероксидазы, входящей в состав одной из основных бактерицидных систем фагоцитов.

    3. Доказано, что биологически активных вещества растительных экстрактов повышают миелопероксидазную активность нейтрофилов крови экспериментальных животных зараженных M.leprae и тем самым, оказывают иммунопротективное действие. Кроме того, эти вещества способствуют стимуляции клеточного иммунитета, усиливая фагоцитарные функции макрофагов.

    4. Отмечено, что под воздействием биологически активных веществ растительных экстрактов клетки Staphylococcus aureus изменяли свою морфологическую структуру по сравнению с интактными клетками, а также способствовали склеиванию их в конгламераты, при резком сокращении клеток в поле зрения. Установлено, что в экстрактах растений Астраханской области содержатся лектиноподобные белковые компоненты, способные связываться с синтетическими лектинузнающими углеводами клеточных стенок бактерий.

    5. На основании проведенных исследований предложена возможность использования биологически активных веществ экстрактов растений для противотуберкулезной терапии в эксперименте.

Апробация работы:

Основные результаты исследования обсуждались на международных конференциях, материалы работы доложены на заседании Астраханского областного научно-практического общества микробиологов и эпидемиологов (2005 – 2006 гг.); на ученом совете НИИ по изучению лепры (2007 – 2008 гг.).

Публикации. По теме диссертации опубликовано 11 научных работ, среди которых, 2 за рубежом и материалах ВАК.

Объем и структура работы.

Диссертация изложена на 131 страницах и состоит из введения, обзора литературы, материалов и методов исследования, результатов собственных исследований, обсуждения и выводов и библиографического указателя, включающего 137 источников: 109 отечественной и 26 зарубежной литературы. Работа иллюстрирована 48 рисунками, 6 таблицами и 3 схемами.

Содержание работы

Материалы и методы исследования

Работа выполнена в Астраханском государственном университете на кафедре физиологии и морфологии человека и животных и на кафедре биотехнологии и биоэкологии в 2002-2005 гг. и в ФГУ «НИИ по изучению лепры Минздравсоцразвития РФ» в лабораториях микробиологии и электронной микроскопии в 2005-2008 гг.

Объектом исследования были клетки микроорганизмов: Mycobacterium tuberculosis, Mycobacterium lufu, Mycobacterium leprae и Staphylococcus aureus, которые подвергались воздействию биологически активных веществ (БАВ) экстрактов растений Астраханской области: Бессмертника песчаного (Helichrysum arenarium L.), Тысячелистника мелкоцветкового (Achillea micrantha) и Солодки голой (Glycyrrhiza glabra).

При выполнении работы был применен комплекс методов исследования: морфологические, электронно-микроскопические, цитохимические, микробиологические, иммунологические, экспериментальные и статистические.

Морфологические методы. С целью показать влияния изучаемых веществ на клетки микроорганизмов проведено морфоструктурное исследование измененных клеток в сравнении с нормальными клетками при помощи светового и электронного микроскопа. Микропрепараты для световой микроскопии высушивали и фиксировали над пламенем спиртовки. Окрашивали по методу Грама и методу Циля-Нильсена. Микроскопию окрашенных препаратов производили с иммерсионным объективом (х 100).

Электронно-микроскопические исследования. Обработку материала для электронной микроскопии осуществлялась по общепринятым методам. Основным методом, применявшимся в исследовании клеток микобактерий, служил метод ультратонких срезов. В качестве заливочной среды использовалась смесь эпоксидных смол, приготовленная по методу, предложенному Spurr, 1966. Ультратонкие срезы толщиной 50-70нм получали на ультратоме «LKB-8802А» и монтировали на медные сетки. Дополнительное контрастирование срезов проводили насыщенным раствором уранилацетата в 50% этаноле в течение 40мин и 0,3% раствором цитрата свинца в течение 20мин (E.S.Reynolds, 1963). Срезы изучали в электронном микроскопе «Tesla BS-500» при ускоряющем напряжении 80кВ. Фотодокументирование проводили с использованием фотопластинок для ядерных исследований. Затем их сканировали при помощи ПК.

Цитохимические методы. С целью изучения механизма действия биологически активных веществ на микробную клетку в организме мышей зараженных экспериментальной лепрой и леченных растительными экстрактами нами была исследована функциональная способность нейтрофильных гранулоцитов, определяли активность миелопероксидазы как одного из показателей их бактерицидности. Активность миелопероксидазы в перитонеальных макрофагах определяли полуколичественным методом по среднему цитохимическому коэффициенту (И.Г.Бондаренко, 1986, В.В.Меньшиков, 1987).

С целью изучения механизма действия биологически активных веществ на микробную клетку в организме мышей при внутрибрюшинном заражении мышей Mycobacterium tuberculosis и леченных растительными экстрактами была исследована функциональная способность макрофагов. Функциональную активность перитонеальных макрофагов оценивали с помощью теста определения поглотительной способности (В.А.Шатров с соавт.,1985) и уровня активности миелопероксидазы. Для определения поглотительной способности перитонеальных макрофагов учитывали фагоцитарный показатель, представляющий собой процент фагоцитирующих перитонеальных макрофагов к общему числу сосчитанных клеток и фагоцитарное число – среднее количество микобактерий, поглощенных одной клеткой.

Микробиологические методы. Для исследования противомикробной активности клеточных экстрактов нами был использован метод прямой иммунодифузии. Штамм Staphylococcus aureus, любезно предоставленный нам Московским отделом борьбы с туберкулезом, который поддерживался на скошенной среде в пробирках с мясопептонным (МПА) и молочно-солевым агаром пересевали на поверхности МПА в чашке Петри. В заранее проделанные лунки, соблюдая правила стерильности, вносили растворы экстрактов по 25мкл. Чашки Петри инкубировали в термостате при t=370C. Делали не менее пяти исследований. Через 48-72 часа вокруг лунок измерялись диаметры зоны задержки роста (ДЗЗР) в мм и заносили в таблицы.

При изучении морфологических особенностей клеток Mycobacterium tuberculosis под влиянием биологически активных веществ растений Астраханской области культура микобактерий подвергалась предварительным процедурам. Для этого использовался метод серийных разведений (В.Б.Сбойчаков, 2007).

Иммунологические методы использовались для подтверждения наличия в составе клеточных компонентов растений лектиноподобных белков и объяснения механизма действия биологически активных веществ растений на микробные клетки. При проведении исследования использовалась реакция преципитации в агаровом геле (модификация Оухтерлони), между исследуемыми экстрактами и синтетическими лектинузнающими углеводами Lеc-ПАА и Gal-ПАА.

Экспериментальные методы проведена экспериментальная модель лепры на мышах по методу C.C.Shepard, рекомендованная ВОЗ для изучения противолепрозной активности препаратов. Все эксперименты по моделированию патологических процессов у животных, и выведения их из опыта были проведены в соответствии с принципами биоэтики, правилами лабораторной практики (GLP); он соответствует этическим нормам, изложенным в Женевской конвенции (1971), «Международных рекомендациях по проведению медико-биологических исследований с использованием животных» (1985) и в соответствии с приказом МЗ РФ №267 от 19.06.2003, «Об утверждении правил лабораторной практики» (Минздрав СССР №755 от 12.08.1977). Все опыты проводились после введения животным этаминала натрия в концентрации 40мг/кг.

Статистические методы. Статистическую обработку лабораторных данных проводили на персональном компьютере с использованием пакета «Анализ данных» в рамках программы Microsoft Excel. Для оценки достоверности различий между средними арифметическими использовали параметрический критерий Стьюдента (t). Критический уровень достоверности нулевой статистической гипотезы принимали равным 0,05 (Г. Ф. Лакин, 1987).

Сбор сырья для приготовления экстрактов производился в Астраханской области (Приволжский, Наримановский районы) в период с 2000 по 2005 гг.

По оригинальной методике (номер заявки 2007118573/13(020248), получено положительное решение формальной экспертизы) были приготовлены растворы для экстрагирования биологически активных веществ собранного и высушенного растительного сырья и получены экстракты.

Результаты исследований и их обсуждение

Клетки микроорганизмов по своей структуре и функциям, представляют собой целостный одноклеточный организм, отвечающий за физиологическую регуляцию и самовоспроизведение. Известно также, что клетки микроорганизмов высоко изменчивы, то есть, способны к адаптации в системе окружающей среды. Клетки микобактерий имеют особенности к мимикрии и вызывают у организма-хозяина хронические формы патологий. Поэтому в нашей работе изучались клетки микроорганизмов как самостоятельные саморегулирующие и самовоспроизводящие структуры, а также изменение структуры, морфологии и функции микробных клеток под влиянием компонентов химических веществ, выделяемых клетками различных дикорастущих растений. Изучали бактериальные клетки во взаимосвязи с функциями клеток организма-хозяина: функциональную способность макрофагов, ферментативную активность фагоцитарных клеток периферической крови зараженных животных под влиянием биологически активных веществ растений

В связи с этим практически важным для настоящего исследования были два момента. Первый, это изучить морфологические, ультраструктурные особенности изменений бактериальных клеток под влиянием биологически активных веществ экстрактов ряда дикорастущих лекарственных растений Астраханского региона.

Второй момент – это проследить взаимодействие между бактериальными клетками и организмом-хозяином. В частности наблюдение за функциональной способностью фагоцитов зараженных экспериментальных животных под влиянием биологически активных веществ растений. А также проследить механизм инактивации с последующим разрушением или конгломерацией морфологических структур клеток бактерий при взаимодействии компонента клеточных структур микроорганизмов с белковыми веществами растений.

Для этого было проведено изучение изменений морфологических признаков клеток микобактерий (M.tuberculosis и M.lufu) под влиянием биологически активных веществ водноспиртовых и буферных экстрактов соцветий Helichrysum arenarium L., Achillea micrantha W., корня, стебля и листьев Glycyrrhiza glabra.

Микроскопические исследования показали, что под влиянием биологически активных веществ экстрактов клетки микобактерий теряют характерную структуру по сравнению с интактными клетками. Клетки M.tuberculosis становились более короткими и увеличивались в диаметре. Надо полагать, что происходит торможение нормальных функций клеточного деления. Наблюдались только фрагменты с неровными краями. Видимо, изменяется проницаемость клеточной мембраны. Подобные изменения по литературным данным возникают у трепонем при действии пенициллина. Авторы утверждают, что микроорганизм частично разрушается, происходит утрата защитного мукополисахаридного слоя клеточной стенки, нарушение клеточного деления и синтеза клеточной стенки (Н.М.Овчинников и В.В.Делекторский, 1974). Кроме того, клетки микобактерий образовывали скопление гранулярного вещества внутри. Образование гранул является результатом приспособления или модификации, указывающих на пластичность микробной клетки (Р.Ж.Дюбо, 1948). Среди окрашенных (кислотоустойчивых) то есть живых клеток M.tuberculosis обнаруживались множество неокрашенных «тени» убитых клеток. По мнению П.Дж.Бреннана и Ф.Дрепера (2002) появление неокрашенных (некислотоустойчивых, неживых) клеток имеет место в определенных условиях, является результатом нарушения нормальных функций синтеза кислотоустойчивых липидов или изменения проницаемости клеточной мембраны, которые обычно обеспечивают кислотоустойчивость.

Под действием биологически активных веществ экстрактов растений количество клеток M. lufu значительно сокращалось по сравнению с контролем, среди которых встречались и клетки с гомогенным и гранулярным протопластом. Можно предположить, что клетка, заполненная гранулярным веществом с четкими контурами являлась еще жизнеспособной, а экземпляры с одной тонкой оболочкой активные вещества растительных экстрактов разрушали, растворяя их гранулярное вещество. Похожие изменения наблюдались Н.М.Овчинниковым и В.В.Делекторским (1974) в культурах гонококков при воздействии пенициллина. Цитоплазматическое вещество у таких форм отсутствует или обнаруживается в весьма незначительном количестве.

Встречались клетки с более тонким и длинным строением концевых образований по сравнению с инактными. Чрезмерная, необычная длина микобактерий, по-видимому, указывает на то, что под действием биологически активных веществ растений процесс подготовки к делению клетки не был завершен и привел к гибели клеток. Подтверждением этого предположения являются, наблюдения Н.А.Красильникова (1958) при изучении влияния антибиотиков на размножение клеток. Подобная деформация клеток микроорганизмов отмечалась автором у разных представителей микроорганизмов при воздействии пенициллина, стрептомицина и других антибиотических веществ, приводящих к возникновению удлиненных не свойственных морфологическим формам клеточных структур. Клетки с нарушенным делением в нашей работе, как правило, были не жизнеспособными.

Таким образом, изучение морфологических признаков клеток микобактерий (M.tuberculosis и M.lufu) и изменения их под влиянием растительных экстрактов показывает, что даже при низких концентрациях микробные клетки претерпевают значительные изменения до разрушения. Биологически активные растительные вещества способны либо повреждать клеточные стенки и микрокапсулу микобактерий, либо приводить к нарушению процесса деления клеток, вызывая появление удлиненных морфологически измененных форм, либо адсорбироваться на поверхности, вызывая их агглютинацию. Неокрашенные клетки, возможно, свидетельствуют о нарушении синтеза кислотоустойчивых липидов или изменения проницаемости клеточной мембраны, которые обычно обеспечивают кислотоустойчивость. Скопление гранулярного вещества внутри микробной клетки является измененным способом размножения вследствие воздействия неблагоприятных факторов. Гранулы являются не только скоплением резервных питательных веществ, они содержат энзимы. Депрессия или латентность этих энзимов приводят к модификациям (П.Дж.Бреннан, Ф.Дрепер, 2002).



Скачать документ

Похожие документы:

  1. Влияние нарушения маточно-плацентарного кровообращения на структуру лимбической системы головного мозга крыс в раннем постнеонатальном онтогенезе и его биохимическая коррекция

    Документ
    ВЛИЯНИЕ НАРУШЕНИЯ МАТОЧНО-ПЛАЦЕНТАРНОГО КРОВООБРАЩЕНИЯ НА СТРУКТУРУ ЛИМБИЧЕСКОЙ СИСТЕМЫ ГОЛОВНОГО МОЗГА КРЫС В РАННЕМ ПОСТНЕОНАТАЛЬНОМ ОНТОГЕНЕЗЕ И ЕГО БИОХИМИЧЕСКАЯ КОРРЕКЦИЯ
  2. «биологическая активность»

    Лекция
    Лекарственными веществами называют биологически активные вещества, применение которых для профилактики и лечения заболеваний человека разрешено законодательно.
  3. Методичка №47 : Фармация Физиология «жкт»

    Методичка
    Биосинтез белкаЛюбая живая клетка способна синтезировать белки, и эта способность представляет одно из наиболее важных и характерных ее свойств. С особенной энергией идет биосинтез белков в период роста и развития клеток.
  4. Программа фундаментальных научных исследований государственных академий наук на 2008 - 2012 годы

    Программа
    1. Основание для разработки Программы фундаментальных научных исследований государственных академий наук, цели, задачи и основные принципы ее реализации
  5. Программа фундаментальных научных исследований государственных академий наук на 2008 2012 годы в ред. Постановления Правительства РФ от 10. 03. 2009 n 219

    Программа
    1. В целях обеспечения стабильности финансирования фундаментальных научных исследований утвердить прилагаемую Программу фундаментальных научных исследований государственных академий наук на 2008 - 2012 годы.

Другие похожие документы..